उत्पादनहरू

ट्रिस एसीटेट नुन बारम्बार TAE (Tris-acetate-EDTA) बफरको तयारीमा प्रयोग गरिन्छ, जुन चलिरहेको बफरको रूपमा र agarose जेलहरूमा प्रयोग गरिन्छ।Tris Acetate-EDTA बफर DNA agarose जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि प्रयोग गरिन्छ तर गैर-denaturing RNA agarose जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि पनि प्रयोग गरिन्छ।डबल-स्ट्र्यान्डेड DNA अन्य बफरहरूको तुलनामा TAE मा छिटो दौडन्छ र विस्तारित इलेक्ट्रोफोरेसिसको समयमा थकित हुन सक्छ।विस्तारित इलेक्ट्रोफोरेसिसको समयमा बफर सर्कुलेशन वा बफर प्रतिस्थापनले तल्लो बफरिङ क्षमतालाई सुधार गर्न सक्छ।समाधानमा DNA को गतिशीलता अध्ययन गर्न विभिन्न सांद्रताहरूमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।TBE बफरमा बोरेट (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X पाउडर प्याक, sc-296651) धेरै इन्जाइमहरूको लागि बलियो अवरोधक भएकोले, TAE बफरलाई DNA नमूनाको लागि इन्जाइम्याटिक अनुप्रयोगहरू हेर्दा सिफारिस गरिन्छ।ट्रिस एसीटेट नुन पनि फायरफ्लाइ लुसिफेरेजको साथ एटीपी एसेसहरूमा उच्च संवेदनशीलता भएको बफर हो।

प्रयोगहरू: TAE चलिरहेको बफर DNA agarose जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि सबैभन्दा सामान्य रूपमा प्रयोग हुने बफर हो, र नेटिभ RNA agarose जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि पनि प्रयोग गरिन्छ।डबल-स्ट्र्यान्डेड DNA अन्य बफरहरूको तुलनामा TAE मा छिटो सर्छ, तर लामो समयसम्म इलेक्ट्रोफोरेसिसको समयमा बफर आयनहरूको कमीको कारण पौडी खेल्न असफल हुन्छ।लामो समयसम्म इलेक्ट्रोफोरेसिसको समयमा बफर साइकल वा बफर एक्सचेन्जले कम बफर क्षमताको लागि क्षतिपूर्ति गर्न सक्छ।2 40 mM Tris एसीटेट र 1 mM EDTA, pH 8.3 समावेश भएको 1 mMTAE बफर प्राप्त गर्न केन्द्रित TAE बफरलाई पातलो गर्नुहोस्।1 mMTAE बफर agarose जेल र चलिरहेको बफर दुवै रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।अधिकतम रिजोल्युसनको लागि, यो सिफारिस गरिन्छ कि लागू भोल्टेज 5V/सेमी (एकाइ इलेक्ट्रोडहरू बीचको दूरी) भन्दा कम हुनुपर्छ।

आवेदन: TAE चलिरहेको बफर केमिकलबुक जेलमा DNA agarose जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि सबैभन्दा सामान्य रूपमा प्रयोग हुने बफर हो, र यो गैर-denaturing RNA agarose जेल इलेक्ट्रोफोरेसिसको लागि पनि प्रयोग गरिन्छ।डबल-स्ट्र्यान्डेड DNA अन्य बफरहरूको तुलनामा TAE मा छिटो सर्छ, तर लामो समयसम्म इलेक्ट्रोफोरेसिसको समयमा बफर आयनहरूको कमीको कारण पौडी खेल्न असफल हुन्छ।लामो समयसम्म इलेक्ट्रोफोरेसिसको समयमा बफर साइकल वा बफर एक्सचेन्जले कम बफर क्षमताको लागि क्षतिपूर्ति गर्न सक्छ।केन्द्रित TAE बफरलाई 1 mMTAE बफर प्राप्त गर्न पातलो गरिएको थियो जसमा 40 mM Tris एसीटेट र 1 mM EDTA, pH 8.3।1 mMTAE बफर agarose जेल र चलिरहेको बफर दुवै रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।अधिकतम रिजोल्युसनको लागि, यो सिफारिस गरिन्छ कि लागू भोल्टेज 5V/सेमी (एकाइ इलेक्ट्रोडहरू बीचको दूरी) भन्दा कम हुनुपर्छ।

प्रयोगहरू: फायरफ्लाइ लुसिफेरेजको साथ एटीपी पत्ता लगाउन, यो उत्पादन सबैभन्दा संवेदनशील बफर हो;ग्लुटामेट बाध्यकारी पहिचान।

गैर-रिसेप्टर सामग्रीहरूमा [3H] l-ग्लुटामिक एसिडको विस्थापनयोग्य बन्धन।

[3H] L-glutamic एसिड माइक्रोफ्यूज ट्यूब र गिलास बन्धन चार बफरहरूमा अनुसन्धान गरियो।यी सामग्रीहरूमा पृष्ठभूमि बाध्यकारी नगण्य थियो, तर Tris-HCl र Tris-citrate बफरमा सेन्ट्रीफ्युगेशन वा सक्शन द्वारा बढाइएको थियो।यो बाइन्डिङ धेरै कम थियो वा जब HEPES-KOH, वा Tris-acetate बफर यसको सट्टा प्रयोग गरिएको थियो।[3H] माइक्रोफ्यूज ट्यूबहरूमा L-ग्लुटामेट बाइन्डिङ L- तर ग्लुटामेट र एस्पार्टेटको D-isomers द्वारा रोकिएको थियो।DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic एसिडले पनि बाइन्डिङलाई रोकेन।अन्य यौगिकहरू जसले कम देखि मध्यम अवरोध देखाए: N-methyl-D-aspartate, quisqualate, L-glutamic acid dithyl ester, N-methyl-L-aspartate, kainate, र 2-amino-4-phosphonobutyrate।बाइन्डिङ विकृत मुसाको मस्तिष्क झिल्ली द्वारा रोकिएको थियो।एक प्रोटीन-निर्भर [3H] ग्लुटामेट बाइंडिंग बारम्बार जमेको-पघ्ने झिल्ली तयारीको साथ प्राप्त गरिएको थियो जब बाइन्डिंग Tris-एसीटेट बफरमा गरिएको थियो।ग्लुटामेट बिन डिंग परखमा Tris-acetate वा HEPES-KOH बफर प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ।यदि Tris-HCl वा Tris-citrate बफर प्रयोग गरिन्छ भने, माइक्रोफ्यूज ट्यूबहरू वा ग्लास फाइबर फिल्टरहरूमा बाइन्डिङको लागि सही गर्नको लागि उपयुक्त नियन्त्रण प्रयोग गरिनुपर्छ।