उत्पादनहरू

डिजेनेरेटिभ कार्टिलेज रोगहरूमा पुनरुत्पादक औषधिको क्लिनिकल प्रयोगलाई रोक्न कारकहरू मध्ये एक कोशिकाहरूको उपयुक्त स्रोत हो।कोन्ड्रोसाइट्स, कार्टिलेजको एक मात्र प्रकारको कोशिका, कोशिका संख्याहरू विस्तार गर्न संस्कृति परिस्थितिमा भिट्रोमा हुर्काइन्छ, हाइलिन कार्टिलागिनस तन्तुहरू उत्पन्न गर्ने क्षमतासँगै तिनीहरूको फिनोटाइप गुमाउँछ।यस अध्ययनमा हामीले निर्धारण गर्छौं कि सीरम- र वृद्धि-कारक-रहित त्रि-आयामी (3D) कल्चर प्रणालीले भिट्रोमा कार्टिलेज टिस्युहरू बनाउनको लागि पारिएको कोन्ड्रोसाइट्सको क्षमतालाई पुनर्स्थापित गर्छ, एक प्रक्रिया जसले sox9 समावेश गर्दछ। इन्सुलिन र dexamethasone (SF3D) को साथ पूरक उच्च ग्लुकोज सामग्री मिडियामा 3D कोलाजेन-प्रकार-II-लेपित झिल्लीहरूमा उच्च घनत्वमा सेल नम्बर विस्तार (P2) र कल्चर गर्न अनुमति दिन्छ।कोशिकाहरू मोनोलेयर विस्तार पछि र फ्लो साइटोमेट्री, जीन अभिव्यक्ति, र हिस्टोलोजी द्वारा थ्रीडी संस्कृति पछ्याएर विशेषता थिए।redifferentiat ion को समयमा सिग्नलिंग ट्रान्सडक्शन मार्गहरूमा प्रारम्भिक परिवर्तनहरू विशेषता थिए। P2 कोषहरूले 99% CD44(+) र 40% CD105(+) को एक पूर्वज-जस्तै एन्टिजेन प्रोफाइल र इन्टरजोन कोशिकाहरूको सुझाव दिने जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइल देखायो।SF3D मा P2 ले chondrogenic जीन र संचित एक्स्ट्रासेलुलर म्याट्रिक्स व्यक्त गर्यो।इन्सुलिन रिसेप्टर (IR) को HNMPA-(AM3) वा PI-3/AKT किनेज मार्ग (इन्सुलिन उपचार द्वारा सक्रिय) को साथमा वोर्टम्यानिनले कोलाजेन संश्लेषण रोकेको खण्डमा डाउनरेगुलेट गर्दै।HNMPA-(AM3) ले Col2, Col11, र IR जीनका साथै Sox6 र -9 को अभिव्यक्ति कम गर्यो।HNMPA-(AM3) को उपचार गरिएको कोशिकाहरूको सह-इम्युनोप्रीसिपिटेशन र क्रोमाटिन इम्युनोप्रीसिपिटेशन विश्लेषणहरूले Sox9 सँग कोएक्टिभेटर Sox6 र Med12 को बाइन्डिङ देखाएको छ तर Sox9-Col2a1 बाइन्डिङ घटाएको छ। हामीले एउटा उपन्यास संस्कृति विधिको वर्णन गर्छौं जसले chondro को संख्या बढाउन र प्रवर्द्धन गर्न अनुमति दिन्छ। इन्सुलिन-मध्यस्थ Sox9-Col2a1 बाइन्डिंग द्वारा आंशिक रूपमा hyaline-जस्तो कार्टिलेज ऊतक गठन।संयुक्त मर्मतमा प्रयोगको लागि यस दृष्टिकोण मार्फत उत्पन्न टिश्युको उपयुक्तता vivo मा जाँच गर्न आवश्यक छ।