उत्पादनहरू

LecA (PA-IL) स्यूडोमोनास एरुगिनोसा द्वारा उत्पादित साइटोटोक्सिक लेक्टिन र एडेसिन हो जसले हाइड्रोफोबिक ग्यालेक्टोसाइडहरूलाई उच्च विशिष्टता र आत्मीयतासँग बाँध्छ।बायोफिल्म एक्स्ट्रासेलुलर म्याट्रिक्सको lecA-egfp अनुवाद फ्यूजन र इम्युनोब्लोट विश्लेषण प्रयोग गरेर, हामी देखाउँछौं कि lecA बायोफिल्म-उत्पन्न कोशिकाहरूमा व्यक्त गरिएको छ।दुबै polystyrene र स्टेनलेस स्टील मा स्थिर बायोफिल्म assays मा, बायोफिल्म गहिराई र सतह कभरेज lecA को उत्परिवर्तन द्वारा घटाइएको थियो र LecA-अधिक उत्पादन तनाव PAO-P47 मा बढाइएको थियो।अभिभावक स्ट्रेन, PAO-P47 द्वारा बायोफिल्म सतह कभरेज तर स्टील कुपनहरूमा lecA उत्परिवर्ती पनि isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) वा p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside (आईपीटीजी) को उपस्थितिमा वृद्धि द्वारा रोकिएको थियो। NPG)।यसबाहेक, यी हाइड्रोफोबिक ग्यालेक्टोसाइडहरूको अनुपस्थितिमा बनाइएका परिपक्व जंगली-प्रकारको बायोफिल्महरू IPTG को थप गरेर फैलाउन सकिन्छ।यसको विपरित, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n को लागि उच्च आत्मीयता भएको p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) को थपले बायोफिल्म गठन वा फैलावटमा कुनै प्रभाव पारेन।P. aeruginosa PAO1 को प्लान्क्टोनिक बृद्धि IPTG, NPG वा NPF को उपस्थितिबाट अप्रभावित थियो, न त स्ट्रेनले यी चिनीहरूलाई कार्बन स्रोतको रूपमा प्रयोग गर्न सक्षम थियो, सुझाव दिन्छ कि बायोफिल्म गठनमा परेको प्रभाव LecA-ligand को प्रतिस्पर्धात्मक अवरोधको कारण थियो। बाध्यकारी।यस्तै परिणामहरू स्टिल कुपनहरूमा गतिशील प्रवाह अवस्थाहरूमा हुर्किएका बायोफिल्महरूका लागि पनि प्राप्त भएका थिए, जसले LecA ले विभिन्न वातावरणीय परिस्थितिहरूमा P. aeruginosa बायोफिल्म वास्तुकलामा योगदान पुर्‍याउँछ भन्ने सुझाव दिन्छ।

Arabidopsis बिरुवाको पातहरूमा xyloglucan oligosaccharides को साइड चेनबाट t-fucosyl अवशेष छोड्न सक्षम अल्फा-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) पत्ता लागेको छ।यसबाहेक, समान सब्सट्रेट विशिष्टताको साथ अल्फा-एल-फ्यूकोसिडेजलाई SDS-PAGE मा एकल ब्यान्ड रेन्डर गर्न गोभी (ब्रासिका ओलेरेसिया) पातहरूबाट शुद्ध गरिएको थियो।यस प्रोटीन ब्यान्डबाट दुई पेप्टाइड अनुक्रमहरू प्राप्त गरियो, र तिनीहरू अल्फा-फुकोसिडेसको लागि एराबिडोप्सिस जीन कोडिङ पहिचान गर्न प्रयोग गरियो जसलाई हामीले AtFXG1 कल गर्न प्रस्ताव गर्छौं।थप रूपमा, ज्ञात अल्फा-एल-फ्यूकोसिडेसेसको साथ होमोलोजी भएको एराबिडोप्सिस जीन पनि फेला परेको छ, र हामीले यसलाई AtFUC1 नाम दिन प्रस्ताव गरेका छौं।दुबै AtFXG1 र ATFUC1 पिचिया पास्टोरिस कोशिकाहरूमा र संस्कृति माध्यममा लुकेका अल्फा-एल-फुकोसिडेस गतिविधिहरूमा भिन्नतापूर्वक व्यक्त गरिएको थियो।AtFXG1 द्वारा एन्कोड गरिएको अल्फा-L-fucosidase xyloglucan XXFG बाट oligosaccharides विरुद्ध साथै 2'-fucosyl-lactitol विरुद्ध सक्रिय थियो तर p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside विरुद्ध होइन।यद्यपि, AtFUC1 विषम रूपमा व्यक्त गरिएको 2'-fucosyl-lactitol विरुद्ध मात्र सक्रिय थियो।तसर्थ, पहिलेको xyloglucan मेटाबोलिज्मसँग सम्बन्धित हुनुपर्छ।