ONPG CAS:369-07-3 98.0% न्यूनतम सेतो देखि बन्द-सेतो पाउडर
क्याटलग नम्बर | XD90006 |
CAS | ३६९-०७-३ |
उत्पादनको नाम | ONPG(2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranoside) |
आणविक सूत्र | C12H15NO8 |
आणविक वजन | ३०१.२५ |
भण्डारण विवरणहरू | २ देखि ८ डिग्री सेल्सियस |
सामंजस्यपूर्ण ट्यारिफ कोड | 29400000 |
उत्पादन विशिष्टता
शुद्धता (HPLC) | न्यूनतम९८.०% |
उपस्थिति | सेतो देखि अफ-सेतो पाउडर |
समाधान(१% पानीमा) | स्पष्ट, रंगहीन देखि थोरै पहेंलो समाधान |
पानी सामग्री(कार्ल फिशर) | अधिकतम०.५% |
विशिष्ट अप्टिकल रोटेशन [α]D20(c=1, H2O) | - 65.0 ° C देखि -73.0 ° C |
ONPG परीक्षण (β-galactosidase test) मा छलफल
हालसालै प्रश्नहरू बारम्बार उठाइएको छ: 1. किन ONPG परीक्षण ढिलो ल्याक्टोज किण्वन छुट्याउन प्रयोग गर्न सकिन्छ?2. किन राष्ट्रिय मानकले ONPG परीक्षणको लागि 3% सोडियम क्लोराइड ट्राइसेकराइड आइरन (वा ट्राइसेकराइड आइरन) प्रयोग गर्न आवश्यक छ भनी बताउँछ?3. Vibrio parahaemolyticus को लागि, OPNG परीक्षण गर्दा, टोल्युइनलाई मापदण्ड अनुसार ड्रपवाइज किन थप्नु पर्छ?कार्य के हो?
हाम्रो कम्पनीले धेरै जानकारीको समीक्षा गरेको छ, यसलाई संक्षेपमा प्रस्तुत गरेको छ, र तल तपाइँसँग साझेदारी गरेको छ:
सिद्धान्त: ONPG को चिनियाँ नाम o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside हो।ONPG लाई β-galactosidase द्वारा galactose र पहेंलो o-nitrophenol (ONP) मा हाइड्रोलाइज गर्न सकिन्छ, त्यसैले β-galactosidase को गतिविधि संस्कृति माध्यमको रंग परिवर्तन द्वारा पत्ता लगाउन सकिन्छ।
ल्याक्टोज एक चिनी हो जुन धेरै सूक्ष्मजीवहरूले पत्ता लगाउन आवश्यक छ।यसको चयापचयलाई दुई इन्जाइमहरू चाहिन्छ, एउटा सेल पर्मेज हो, ल्याक्टोज पर्मेजको कार्य अन्तर्गत कोशिकाहरूमा प्रवेश गर्दछ;अर्को β-galactosidase हो, जसले ल्याक्टोजलाई ग्यालेक्टोजमा हाइड्रोलाइज गर्छ।ल्याक्टोज र ग्लुकोज।β-Galactosidase ले ONPG मा ग्यालेक्टोज र पहेंलो ओ-नाइट्रोफेनोल (ONP) मा हाइड्रोलाइज गर्न सीधा कार्य गर्न सक्छ।यो २४ घण्टामा गर्न सकिन्छ, ल्याक्टोज ढिलो किण्वनका साथ पनि।त्यसकारण, यसले अगर तिरछाबाट कल्चर 1 छनोट गर्ने र यसलाई 1-3 घण्टा र 24 घण्टाको लागि 36 डिग्री सेल्सियसमा पूर्ण सर्कलमा इनोकुलेट गर्ने अवलोकन परिणामहरू वर्णन गर्दछ।यदि β-galactosidase उत्पादन भयो भने, यो 1-3 घन्टामा पहेंलो हुन्छ, यदि त्यहाँ त्यस्तो इन्जाइम छैन भने, यसले 24 घण्टामा रंग परिवर्तन गर्दैन।
माथिका दुई इन्जाइमहरू अनुसार सूक्ष्मजीवहरूलाई निम्न वर्गहरूमा विभाजन गर्न सकिन्छ:
1 lactose-fermenting (18-24 घण्टा) permease र β-galactosidase P + G + संग ब्याक्टेरिया;
२ ढिलो हुने ल्याक्टोज किण्वन (२४ घण्टा भन्दा बढी समय लाग्ने) पर्मेजको कमी नभएको तर ग्यालेक्टोसिडेज भएको: P-G+।
3 गैर-ल्याक्टोज किण्वनमा पर्मेज र ग्यालेक्टोसिडेज दुवैको कमी: P- G-।
ONPG परीक्षणलाई ल्याक्टोज-ल्याग-फरमेन्टिङ ब्याक्टेरिया (P-G+) लाई गैर किण्वन गर्ने ल्याक्टोज ब्याक्टेरिया (PG-) बाट छुट्याउन प्रयोग गर्न सकिन्छ, जस्तै:
1 लेट ल्याक्टोज किर्मेन्टरहरू (P-G+) लाई गैर-ल्याक्टोज फर्मेन्टरहरू (P-G-) बाट फरक पार्नुहोस्।
(a) सिट्रोब्याक्टर (+) र साल्मोनेला एरिजोना (+) साल्मोनेला (-) बाट।
(b) Escherichia coli (+) Shigella sonnei (-) बाट।
3% सोडियम क्लोराइड फेरिक ट्राइसेकराइड (आइरन ट्राइसेकराइड) मा रातारात कल्चर प्रयोग गरेर ONPG परख किन गरियो?हाम्रो कम्पनीले धेरै जानकारी परामर्श गरेको छ, तर त्यहाँ कुनै स्पष्ट कथन छैन।केवल FDA वेबसाइटमा, यो लेखिएको छ कि "ट्रिपल चिनी आइरन अगर स्लान्टमा परीक्षण गर्न कल्चरहरू इनोकुलेट गर्नुहोस् र 18 घन्टाको लागि 37 डिग्री सेल्सियस (वा अन्य उपयुक्त तापक्रम, यदि आवश्यक भएमा) इन्क्युबेट गर्नुहोस्। पोषक (वा अन्य) अगर स्लान्टहरू 1.0 समावेश गर्दछ। % ल्याक्टोज पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ।"मतलब: परीक्षण ब्याक्टेरियालाई ट्राइसेकराइड आइरन मिडियममा इनोक्युलेसन गरिएको थियो र 18 घण्टाको लागि 37 डिग्री सेल्सियसमा कल्चर गरिएको थियो।1% ल्याक्टोज भएको पोषक अगर स्लान्ट (वा अन्य) माध्यम पनि स्वीकार्य छन्।त्यसकारण, यो अनुमान गरिएको छ कि ट्राइसेकराइड फलामको माध्यमले ल्याक्टोज समावेश गर्दछ।रातभरको वृद्धि पछि, ब्याक्टेरियाले राम्रो सक्रिय β-galactosidase उत्पादन गरेको छ।यस्तो ब्याक्टेरिया प्रयोग गरेर, ONPG लाई β-galactosidase द्वारा छिटो विघटन गर्न सकिन्छ।प्रयोगात्मक घटना छिटो र राम्रो प्रकट छ।थप रूपमा, β-galactosidase लाई पूर्ण रूपमा रिलिज गर्नको लागि टोल्युनिको ड्रपवाइज थप्ने र 5 मिनेटको लागि पानीको नुहाउने कार्य हो।