उत्पादनहरू

अन्य सकारात्मक-स्ट्र्यान्ड आरएनए भाइरसहरू जस्तै, टम्बुसभाइरसहरू झिल्ली-बाउन्ड भाइरल प्रतिकृति कम्प्लेक्स (VRC) द्वारा प्रतिकृति हुन्छन्।VRC मा p92 भाइरस-कोड गरिएको RNA-निर्भर RNA पोलिमरेज (RdRp), भाइरल p33 RNA चेपेरोन, र धेरै सह-अप्टेड होस्ट प्रोटीनहरू हुन्छन्।यसको अनुवाद पछि कार्यात्मक RdRp बन्नको लागि, p92 प्रतिकृति प्रोटीन VRC मा समावेश गरिनु पर्छ, यसको सक्रियता पछि।टमाटो बुशी स्टन्ट भाइरस (TBSV) RdRp को सक्रियतालाई घुलनशील होस्ट कारक (हरू) को आवश्यकता छ भनेर हामीले पहिले सेल-फ्री खमीर एक्स्ट्र्याक्ट-आधारित परखमा देखाइसकेका छौं।यस लेखमा, हामीले सेलुलर तातो झटका प्रोटीन 70 (Hsp70) लाई एन-टर्मिनली काटिएको पुन: संयोजक TBSV RdRp को सक्रियताको लागि आवश्यक सह-अप्टेड होस्ट कारकको रूपमा पहिचान गर्छौं।थप रूपमा, Hsp70 प्रकार्यको सानो-अणु-आधारित अवरुद्धले भिट्रोमा tombusvirus RdRp द्वारा RNA संश्लेषणलाई रोक्छ।यसबाहेक, हामी देखाउँछौं कि तटस्थ फास्फोलिपिडहरू, अर्थात्, फास्फेटिडाइलथेनोलामाइन (पीई) र फास्फेटिडाइलकोलिन (पीसी), भिट्रोमा आरडीआरपी सक्रियता बढाउँछन्।यसको विपरित, phosphatidylglycerol (PG) ले इन भिट्रो RdRp सक्रियतामा बलियो र प्रमुख अवरोध प्रभाव देखाउँछ।हामी यो पनि देखाउँछौं कि PE र PC ले RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA] अन्तरक्रियालाई उत्तेजित गर्छ, जबकि PG ले RdRp मा भाइरल आरएनएको बन्धनलाई रोक्छ।Tombusvirus RdRp सक्रियतामा विभिन्न phospholipids को उत्तेजक बनाम निरोधात्मक भूमिकाको आधारमा, हामी प्रस्ताव गर्छौं कि लक्षित सबसेलुलर झिल्लीको लिपिड संरचना tombusviruses द्वारा संक्रमणको क्रममा नयाँ VRC असेंबली विनियमित गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ। भाइरस-कोडित RNA-निर्भर RNA- (RdRp), जुन धेरै सकारात्मक-स्ट्र्यान्ड आरएनए भाइरसहरूको संक्रमित कोशिकाहरूमा भाइरल आरएनए प्रोजेनीलाई संश्लेषण गर्न जिम्मेवार छ, सुरुमा निष्क्रिय छ।यो रणनीतिले साइटोसोलमा भाइरल आरएनए संश्लेषणबाट बच्न सम्भव छ जसले छिटो आरएनए-ट्रिगर गरिएको सेलुलर एन्टिभाइरल प्रतिक्रियाहरू समावेश गर्दछ।झिल्ली-बाउन्ड प्रतिकृति कम्प्लेक्सको संयोजनको क्रममा, भाइरल RdRp अपूर्ण रूपमा बुझिएको प्रक्रिया मार्फत सक्रिय हुन्छ जसले RdRp लाई RNA संश्लेषण गर्न सक्षम बनाउँछ।TBSV RdRp प्रयोग गरेर, हामी देखाउँछौं कि सह-अप्टेड सेलुलर Hsp70 chaperone र तटस्थ फस्फोलिपिडहरूले RdRp सक्रियतालाई भिट्रोमा सुविधा दिन्छ।यसको विपरित, phosphatidylglycerol (PG) को इन भिट्रो RdRp सक्रियता र RdRp-भाइरल आरएनए अन्तरक्रियामा प्रभावकारी निरोधात्मक प्रभाव छ, सुझाव दिन्छ कि RdRp वरपरको झिल्ली माइक्रोडोमेनले RNA संश्लेषणको लागि यसको क्षमतालाई धेरै असर गर्छ।यसरी, भाइरल RdRp को सक्रियता सम्भवतः संक्रमित कोशिकाहरूमा धेरै होस्ट घटकहरूमा निर्भर गर्दछ।