उत्पादनहरू

डीएनए आधारहरूमा अक्सिडेटिभ क्षतिले सामान्यतया अक्सिडाइज्ड प्यूरिनहरू, विशेष गरी 7,8-डाइहाइड्रो-8-अक्सोगुआनिन (8-oxoG) र 7,8-डाइहाइड्रो-8-अक्सोएडेनिन (8-oxoA) को गठनमा परिणाम दिन्छ, पहिलेको राम्रो- ज्ञात mutagenic घाव।8-oxoG सजिलैसँग सामान्य आधारहरूको तुलनामा थप अक्सीकरणको विषय भएको हुनाले, DNA संश्लेषणको क्रममा 8-oxoG को अक्सिडाइज्ड फारमको विपरित आधारको सम्मिलन भिट्रोमा अनुसन्धान गरिएको थियो।एकल 8-oxoG घाव भएको सिंथेटिक टेम्प्लेटलाई पहिले विभिन्न एक-इलेक्ट्रोन अक्सिडेन्ट वा सिंगल अक्सिजन अवस्थाहरूमा उपचार गरिएको थियो र त्यसपछि Klenow खण्ड एक्सो- (Kf exo-), बाछो थाइमस DNA पोलिमरेज अल्फा (पोल अल्फा) द्वारा उत्प्रेरित प्राइमर विस्तारको अधीनमा थियो। ) वा मानव डीएनए पोलिमरेज बिटा (पोल बिटा)।अघिल्लो रिपोर्टहरूसँग मिल्दोजुल्दो, dAMP र dCMP सबै तीन DNA पोलिमरेजहरूसँग 8-oxoG को विपरित छनोट गरी सम्मिलित गरिन्छ।चाखलाग्दो कुरा के छ भने, 8-oxoG को अक्सीकरणले Kf द्वारा घावको विपरीत dAMP र dGMP सम्मिलन प्रेरित गर्न फेला पारेको थियो- परिमार्जित आधारको साइटमा हुने प्राइमर एक्सटेन्सनको अस्थायी अवरोधको साथ।यसबाहेक, पोल अल्फा र पोल बीटा द्वारा डीएनए संश्लेषणको क्रममा घावले ब्लक बनाउँछ।8-oxoA-परिमार्जित टेम्प्लेट oligonucleotide को साथ प्रयोगहरूले 8-oxoA र Kf exo- द्वारा dTMP को प्रत्यक्ष सम्मिलित 8-oxoA को एक अक्सिडाइज्ड रूप दुवै देखाउँछ।IrCl62 सँग अक्सिडेशन हुनु अघि र पछि 8-oxoG- युक्त ओलिगोन्यूक्लियोटाइडहरूको मास स्पेक्ट्रोमेट्रिक विश्लेषण-मुख्य रूपमा 8-oxoG साइटको अक्सीकरणसँग मिल्दोजुल्दो छ, परिणामस्वरूप प्रमुख उत्पादनको रूपमा guanidinohydantoin moiety को गठन हुन्छ।एबेसिक साइटहरूको गठनको लागि कुनै प्रमाण प्राप्त भएको छैन।यी परिणामहरूले देखाउँछन् कि 8-oxoG को एक अक्सिडाइज्ड फारम, सम्भवतः guanidinohydantoin, DNA संश्लेषणको क्रममा dNTPs को गलत पठन र गलत प्रयोगलाई निर्देशित गर्न सक्छ।यदि यस्तो प्रक्रिया vivo मा भयो भने, यसले G-->T र G-->C ट्रान्सभर्सनहरूमा नेतृत्व गर्ने बिन्दु म्युटेजेनिक घावलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ।यद्यपि, 8-oxoA को सम्बन्धित अक्सिडाइज्ड फारमले मुख्य रूपमा Kf exo- सँग DNA संश्लेषणको क्रममा T को सही सम्मिलन देखाउँछ।