उत्पादनहरू

प्रोटिन फास्फोरिलेसनले विभिन्न सेलुलर कार्यहरूलाई नियमन गर्छ र बिरुवाहरूको प्रारम्भिक विकासमा मुख्य भूमिका खेल्छ।Arabidopsis बिरुवाहरूमा प्रोटीन फास्फोरिलेसनको अघिल्लो अनुसन्धानहरूमा पूरक र विस्तार गर्न हामीले वैकल्पिक दृष्टिकोण प्रयोग गर्‍यौं जुन प्रोटीन निकासीलाई गैर-डिनेचर अवस्थाहरूमा स्थिर मेटल-आयन एफिनिटी क्रोमेटोग्राफी (IMAC) को संवर्धनको साथ Rubisco-depleted identifications मा अक्षुण्ण फास्फोप्रोटिनको संवर्धनको साथ संयोजन गर्दछ। दुई-आयामी जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (2-DE) र तरल क्रोमेटोग्राफी-टेन्डम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (LC-MS/MS) प्रयोग गर्दै।इन-जेल ट्रिप्सिन पाचन र चयनित जेल स्पटहरूको विश्लेषणले 144 फस्फोरिलेटेड पेप्टाइड र अवशेषहरू पहिचान गर्‍यो, जसमध्ये केवल 18 फस्फोपेप्टाइडहरू र 8 फस्फोसाइटहरू PhosPhAt 4.0 र P3DB Arabidopsis thaliana phosphoesry साइटमा फेला परेका थिए।82 पहिचान गरिएका फस्फोप्रोटिनहरू मध्ये आधाभन्दा बढी कार्बोहाइड्रेट चयापचय, प्रकाश संश्लेषण/श्वासप्रश्वास वा अक्सिडेटिभ तनाव प्रतिक्रिया मेकानी एसएमएसमा संलग्न थिए।2-DE र LC-MS/MS भन्दा पहिले अक्षुण्ण फास्फोप्रोटिनहरूको संवर्धनले पेप्टाइड-स्तर संवर्धन प्रयोग गर्ने विधिहरूको तुलनामा फास्फोरिलेटेड थ्रोनिन र टाइरोसिन अवशेषहरूको पहिचान बढाउने देखिन्छ, जसले सुझाव दिन्छ कि दुई दृष्टिकोणहरू कभरफो साइटको सर्तमा केही हदसम्म पूरक छन्।परिपक्व अरबीडोप्सिस पातहरूका लागि पहिले प्राप्त भएका युवा बिरुवाहरूको परिणामहरूको तुलना गर्दा यी तन्तुहरूमा भिन्न-भिन्न रूपमा फास्फोरिलेटेड पाँच प्रोटीनहरू पहिचान गरियो, बिरुवाको विकासको क्रममा प्रोटीन फास्फोरिलेसनको गतिशीलताको अनुसन्धान गर्नको लागि यस प्रविधिको सम्भाव्यता प्रदर्शन गर्दै।